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科研抗体定制服务

科研抗体定制

多克隆抗体定制 艾令达生物拥有专业的抗体制备人员、先进的抗体制备生产仪器、引进先进的制备技术,根据您的需求专业打造制备方案。
单克隆抗体定制



服务内容

科研院校需向我单位提供详细的抗体资料,并支付一笔经费;我司将在4-6个月完成定制服务。

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服务介绍

多抗制备服务

大多数天然抗原物质(如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等)往往具有多种不同的抗原决定簇,而每一决定簇都可刺激机体产生一种特异性抗体。

多克隆抗体是多个抗原决定簇刺激机体后,由多个免疫淋巴细胞分泌的多种抗体的混合物。


由于这种抗体是不均一的,无论是对抗体分子结构与功能的研究或是临床应用都受到很大限制,因此称为第一代抗体

单抗制备服

在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞(即B细胞),每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇,当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞群,这种由单一细胞增殖形成的细胞群体可称为细胞克隆(clone)。

同一克隆的B细胞可合成和分泌在理化性质、分子结构、遗传标记以及生物学特性等方面都是完全相同的均一性抗体,亦可称之为单克隆抗体。单克隆抗体为只针对某一特定的抗原决定簇,纯度高的抗体,因此称为第二代抗体。

1、优点
(1)制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体;   (2)有很高的效价
(3)有高度的单一性、均一性;          (4)产量高,且可连续生产

2、单克隆抗体制备基本原理

体内免疫法很难获得单克隆抗体,如能将所需要的抗体形成细胞选出,并能在体外进行培养,就可以获得已知特异的单克隆抗体。

杂交瘤细胞:既具有骨髓瘤细胞能大量无限生长繁殖的特性,又具有抗体形成细胞合成和分泌抗体的能力。这种抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体,故称之为单克隆抗体。
应用杂交瘤技术可获得几乎所有抗原的单克隆抗体,只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。
(1)DNA合成
 ① 主要途径:参考生物化学,可被氨基喋呤(A)所阻断
 ② 旁路途径:利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)合成DNA;
        所需要的酶为次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)。
(2)骨髓瘤细胞:来源于BABC/ c小鼠的骨髓瘤细胞系;没有合成抗体的能力;体外具有无限生长繁殖的能力;丧失合成HGPRT和TK的能力;只能通过主要途径合成DNA;在含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 、胸腺嘧啶核苷(T)的HAT培养基中不能生长。
(3)免疫淋巴细胞:通常来源于BALB/c小鼠的脾淋巴细胞;具有合成抗体的能力;具有合成HGPRT和TK的能力;能通过主要途径和旁路途径合成DNA;HAT培养基中能生长,但短寿,只能存活几天,体外不具有无限生长繁殖的能力
(4)融合剂:Kohler和Milstein最早仙台病毒;后来发现聚乙二醇(PEG)的融合效果更好,且避免了病毒的污染问题。
(5)杂交瘤细胞:具有合成抗体的能力(从免疫淋巴细胞获得);具有合成HGPRT和TK的能力(从免疫淋巴细胞获得);能通过主要途径和旁路途径合成DNA;HAT培养基中能生长;体外具有无限生长繁殖的能力(从骨髓瘤细胞获得)。
(6)饲养细胞:单个或少数细胞在体外培养很难成活,必需加入其他细胞以增加细胞密度,维持其代谢,使之成活繁殖;被加入的这种细胞称为“饲养细胞”。最常用的小鼠腹腔巨噬细胞。

3、单克隆抗体制备过程:




制备抗原 → 免疫动物 → 免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备 → 细胞融合 → 杂交瘤细胞的选择培养 → 杂交瘤细胞的的筛选
→ 杂交瘤细胞的克隆化 → 单克隆抗体的检定 → 杂交瘤细胞系的建立 → 单克隆抗体的大量制备(动物体内诱生法和体外培养法)

4、单克隆抗体的应用
(1)诊断试剂:用于各种病原体以及肿瘤的诊断。
(2)治疗试剂:兽医临床上传染病的治疗;医学临床上抑制器官移植排斥、治疗自身免疫疾病、制备生物导弹。
(3)检测试剂:各种病原体毒力因子的检测;各种免疫细胞及其它组织细胞表面分子的检测。



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